猫头鹰的巢穴位置因种类不同而存在显著差异，主要分为树洞、岩石缝隙和地面洞穴三大类型。以雕鸮、草鸮等为代表的大型猫头鹰，常选择天然树洞或啄木鸟遗弃的树洞筑巢，这些巢穴通常位于高大的乔木上，既隐蔽又安全。例如长耳鸮在冬季迁徙至北京天坛公园时，便选择古柏树洞作为越冬巢穴。而雪鸮等极地猫头鹰则因环境限制，仅能利用岩堆或小丘上的苔藓、兽毛搭建简易巢穴。穴鸮等小型种类则展现出独特的洞穴偏好，它们不仅会利用啮齿类动物遗弃的洞穴，还会自行挖掘洞穴作为巢穴。这种选择与猫头鹰的捕食习性密切相关，树洞巢穴便于夜间捕食林间鼠类，而洞穴巢穴则更适应开阔草原环境中的捕猎需求。

部分猫头鹰还会选择“借用”其他动物的巢穴。例如仓鸮常将巢穴筑在农场主的谷仓里，这种选择既利用了谷仓的隐蔽性，又便于捕食农场中的啮齿类动物。这种多样化的巢穴选择策略，既体现了猫头鹰对环境的适应能力，也反映了其生存策略的灵活性。无论选择何种巢穴，猫头鹰都会优先考虑隐蔽性和安全性，以保护后代免受捕食者威胁。