猫头鹰是肉食性动物，食物种类较为丰富，主要以鼠类为食。鼠类是猫头鹰的主要猎物之一，因为鼠类繁殖速度快、数量众多，且大多在夜间活动，与猫头鹰的活动时间相吻合。猫头鹰具有敏锐的听觉和视觉，能够在黑暗中准确地发现鼠类的踪迹。它会悄无声息地飞到鼠类上方，然后突然发动攻击，用锋利的爪子抓住鼠类，再用尖锐的喙将其咬死。

除了鼠类，猫头鹰也会捕食各种小鸟。不同种类的猫头鹰捕食的小鸟种类有所不同，一些大型猫头鹰，如雕鸮，能够捕杀像雉鸡这样较大的鸟类；而小型猫头鹰则主要以麻雀、山雀等小型鸟类为食。猫头鹰在捕食小鸟时，通常会利用自己的飞行技巧，在空中追逐或从栖息的树枝上突然起飞，迅速抓住小鸟。