在自然界中，成年猫头鹰处于食物链的较高位置，很少有动物会主动捕食它们。然而，一些大型猛禽，如金雕、苍鹰等，在食物资源匮乏或与猫头鹰发生领地冲突时，可能会攻击并捕食猫头鹰。
人类也曾是猫头鹰的威胁之一。在过去，由于人类对猫头鹰的误解和偏见，以及对其栖息地的破坏和非法捕猎，导致猫头鹰的数量减少。不过，随着人们对野生动物保护意识的提高，这种情况已经有所改善。
猫头鹰的幼崽和蛋相对较为脆弱，容易成为其他动物的猎物。例如，一些蛇类、浣熊、狐狸等动物可能会趁成年猫头鹰不在时，偷食猫头鹰的蛋或幼崽。这些动物会利用自己的攀爬能力或嗅觉，找到猫头鹰的巢穴，然后发动攻击。
