萤火虫的发光物质主要包括荧光素（在萤火虫中称为萤火虫萤光素）和荧光素酶，这两种物质在萤火虫体内共同作用下产生发光现象。具体来说，荧光素在荧光素酶的催化下消耗ATP（腺苷三磷酸），并与氧气发生反应，这个过程中会产生激发态的氧化荧光素。当氧化荧光素从激发态回到基态时，会释放出光子，从而发出光来。

萤火虫的这种发光被称为冷光，其光色多样，包括黄色、红色及绿色等。萤火虫的发光不仅具有照明的作用，还用于求偶、警戒、诱捕等，是它们之间的一种沟通工具。不同种类的萤火虫发光方式、发光频率及颜色也不同，借此来传达不同的信息。