萤火虫的食性因发育阶段和种类而异，幼虫与成虫呈现显著的食性分化。幼虫为肉食性，以蜗牛、蛞蝓等软体动物为主食，其头部发达的颚片可注入消化液溶解猎物外壳，再吸食液化组织。例如，窗胸萤幼虫专性捕食水生螺类，通过注射含蛋白酶的唾液使猎物麻痹并溶解。

部分种类幼虫也会捕食蚯蚓、昆虫幼虫等小型无脊椎动物。成虫食性则呈现两极分化：多数种类（如黄脉翅萤）因口器退化不再进食，仅依赖幼虫期储存的能量完成繁殖；而少数种类（如扁萤）仍保留摄食功能，以花粉、花蜜或小型节肢动物为食。萤火虫的捕食行为具有生态调控作用——幼虫通过捕食害虫（如稻纵卷叶螟幼虫）可减少农作物损失，而成虫作为授粉者参与植物繁殖。近年来，由于农药使用导致软体动物种群下降，部分萤火虫幼虫面临食物短缺危机，进一步加剧了种群衰退。